Was man unter dem Mikroskop sieht · Fluoreszenz

Was man mit einem Fluoreszenzmikroskop sieht

Eine Schicht Endothelzellen, gefärbt mit drei Fluoreszenzfarbstoffen wie im kommerziellen Präparat FluoCells Nr. 1: DAPI in den Zellkernen, Phalloidin mit Alexa Fluor 488 am Aktin und MitoTracker Red CMXRos in den Mitochondrien. Jeder Farbstoff absorbiert eine Lichtfarbe und emittiert eine andere mit größerer Wellenlänge.

Wechseln Sie den Filter im Bedienfeld: UV, blau oder grün.

100×: die Zellschicht

Die Endothelzellen bilden eine Schicht aus flachen Zellen, eine neben der anderen, wie ein Pflaster. Mit dem Blaufilter sieht man ihr Aktinskelett.

400×: ein Filter, ein Farbstoff

Unter UV-Licht von 365 nm leuchten die Zellkerne blau (DAPI). Unter blauem Licht von 485 nm leuchtet das Aktin grün (Phalloidin). Unter grünem Licht von 525 nm leuchten die Mitochondrien rot (MitoTracker). Der Emissionsfilter lässt das vom Farbstoff ausgesandte Licht durch und sperrt das Anregungslicht.

1000×: Filamente und Mitochondrien

Mit dem Immersionsobjektiv unterscheidet man die Aktinfilamente und die Mitochondrien einzeln. Bleibt das Licht eingeschaltet, verblasst die Fluoreszenz nach und nach: Das ist das Photobleaching (Ausbleichen).

Eine Zelle aus der Nähe

Der Zellkern, das Aktinskelett und die Mitochondrien, jeweils mit ihrem Farbstoff. Unter dem Mikroskop sieht man sie getrennt, jedes mit seinem Filter.

3D-Ansicht: Unter dem Mikroskop sieht man sie flach, von oben.

Welches Fluoreszenzmikroskop brauchen Sie?

Man braucht eine Anregungslichtquelle und einen Filtersatz für jeden Farbstoff. Die Geräte, die in ihrem Datenblatt Fluoreszenz angeben, haben UV-, Blau- und Grün-LEDs mit den passenden Filtern.